MB50679 v.A
脂肪酸β氧化速率比色法檢測試劑盒產品說明書（中文版）
主要用途
脂肪酸β氧化速率（β oxidation rate）比色法檢測試劑是一種旨在通過棕櫚酰肉堿氧化依賴性鐵*還原，即單位時間還原產物的峰值降低，即采用比色法來測定線粒體裂解樣品中脂肪酸β氧化速率的*而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞、組織中線粒體裂解懸液樣品（動物、人體等）脂肪酸β氧化速率的檢測。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定。
技術背景
脂肪酸β氧化過程（β-oxidation）在動物組織的線粒體發生的脂肪酸代謝通路，可概括為活化、轉移、β氧化及后經三羧酸循環被*氧化生成CO2和H2O，并釋放能量等四個階段，是體內，尤其是組織器官，例如肝臟、心臟和骨骼肌等能量內平衡的關鍵代謝通路。食物中甘油三酯提供體內三分之一的能量供給，骨骼肌和心臟消耗80%的總能量。脂肪酸代謝異常，將導致脂質聚集在非脂肪組織內，產生慢性病的病理基礎，例如糖尿病、心衰、肥胖癥等。其中β氧化，包括脫氫、水合、二次脫氫和硫解，是將活化的各種長度脂酰輔酶酯（acyl CoA esters）不斷縮短為乙酰輔酶A（acetyl CoA）單位，后經過三羧酸循環和呼吸鏈氧化成CO2和水。脂?；o酶A脫氫酶（acyl CoA dehydrogenase；AD；EC.1.3.99.3）是脂肪酸代謝進入β-氧化后工作的重要酶之一。通過底物棕櫚酰肉堿（palmitoyl carnitine）的氧化產生的電子，由鐵*（ferricyanide）捕獲而還原，其還原速率的檢測，來評價β氧化的速率，即吸光值（420nm波長）的下降與時間的對應關系。
產品內容
緩沖液（Reagent A） 20毫升
反應液（Reagent B） 2毫升
底物液A（Reagent C） 1毫升
底物液B（Reagent D） 1毫升
陰性液（Reagent E） 1毫升
產品說明書 1份
保存方式
保存 反應液（Reagent B）、 底物液A（Reagent C）和 底物液B（Reagent D）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里； 底物液A（Reagent C）和 底物液B（Reagent D）避免光照；有效保證6月
用戶自備
1.5毫升離心管：用于反應操作的容器
比色皿：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
實驗步驟
- 準備好待測樣品（例如純化線粒體），至于冰槽里備用
- 開啟并設定好分光光度儀（溫度為25℃）：波長420nm和470nm，間隔1分鐘，讀數6次（共5分鐘），并置零
- 從－20℃冰箱里取出試劑，置于冰槽里融化； 底物液A（Reagent C）和 底物液B（Reagent D）避免光照
- 緩沖液（Reagent A）室溫下均衡溫度
